EPOELISA檢測試劑盒樣本處理
儲存及有效期:
未開(kāi)封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開(kāi)封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
實(shí)驗原理:
將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
精密度:
精密度用樣品測定值的變異系數CV表示。CV(%)=SD/mean×100
批內差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進(jìn)行定量檢測,每份樣本連續測定20次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批間差:選取3個(gè)不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本定量測定,每個(gè)樣本使用同一試劑盒重復測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。
批內差: CV<10% Inter-批間差: CV<13%
穩定性:
經(jīng)測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實(shí)驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗員來(lái)進(jìn)行操作可減少人為誤差。
友情提醒:
試劑盒使用完畢后,請妥善處理相關(guān)耗材,避免環(huán)境污染!
EPOELISA檢測試劑盒樣本處理
操作時(shí)應注意:
A. 使用移液器加液與移液槍頭不能混用。
B. 洗板要干凈,避免交叉污染。
C. 嚴格按照試劑盒的說(shuō)明書(shū)操作,反應時(shí)間準確。
D. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內部,操作完成注意做好清潔工作。
E. 不要在測量過(guò)程中關(guān)閉電源。
F. 對于因試劑盒問(wèn)題造成的測量結果的偏差,應根據實(shí)際情況及時(shí)修改酶免測定試劑盒參數,以達到zui佳效果。
G. 使用后蓋好防塵罩。
H. 出現技術(shù)故障時(shí)應及時(shí)與廠(chǎng)家,切勿擅自拆卸酶標儀。